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生物科學(xué) 單細(xì)胞微生物轉(zhuǎn)錄組技術(shù),打開微生物功能研究的新視界
細(xì)菌單細(xì)胞懸液制備:搖菌至對數(shù)生長期(無生長時(shí)期要求的樣本),測量OD600值。2.細(xì)菌固定和透化:利用4%的固定液4℃旋轉(zhuǎn)過夜固定細(xì)菌,讓RNA與蛋白質(zhì)交聯(lián),停止基因表達(dá)并減少RNA降解。...
靈思生物 2026-02-26 02:07
生物科學(xué) 單細(xì)胞微生物轉(zhuǎn)錄組技術(shù)打開微生物功能研究的新視界
細(xì)菌單細(xì)胞懸液制備:搖菌至對數(shù)生長期(無生長時(shí)期要求的樣本),測量OD600值。2.細(xì)菌固定和透化:利用4%的固定液4℃旋轉(zhuǎn)過夜固定細(xì)菌,讓RNA與蛋白質(zhì)交聯(lián),停止基因表達(dá)并減少RNA降解。...
靈思生物 2026-02-07 07:18
生物科學(xué) 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化熱激為啥非得42℃?37℃不行?45℃又咋樣?...
4??實(shí)際操作步驟:手把手教你熱激轉(zhuǎn)化①細(xì)菌培養(yǎng)挑取單克隆:從新鮮活化的平板上挑取細(xì)菌單克隆,接種到含有適當(dāng)抗生素的LB液體培養(yǎng)基中,37℃,210rpm振蕩培養(yǎng)至OD600約為1。擴(kuò)大培養(yǎng):...
畢合生物2024 2025-08-26 05:13
分子生物 5分鐘掌握CCK8實(shí)驗(yàn)!從原理到避坑指南,細(xì)胞增殖檢測一篇就夠了
酶標(biāo)儀檢測450nm吸光度(參比波長600-650nm)。...數(shù)據(jù)解讀公式細(xì)胞活力(%)=[(OD實(shí)驗(yàn)組-OD空白組)/(OD對照組-OD空白組)]×100%應(yīng)用示例:藥物抑制率=100%-細(xì)胞活力%進(jìn)階技巧動(dòng)態(tài)監(jiān)測:同一孔...
夏末~易科 2025-08-07 08:52
分子生物 CCK8細(xì)胞增殖曲線繪制
最好用雙波長檢測,檢測波長450nm,參比波長600nm,參比波長可以過濾掉因?yàn)橐后w渾濁,孔板底部不干凈帶來的測量誤差(OD450-OD600即可,但是我比較懶,沒測參比波長[偷笑R])5?每天定點(diǎn)測量...
夏末~易科 2025-06-09 07:55
碩博家園 枯草芽孢桿菌上罐大神求助
通氣量全程2.5(流量計(jì)數(shù)值),轉(zhuǎn)速200-600與DO級聯(lián),12h補(bǔ)料時(shí)OD大概漲到接近20,12-24hDO一直在40-50%,降不下來。發(fā)酵后期OD最高只能長到30+,40h左右DO會(huì)突然降至接近于0。補(bǔ)料培養(yǎng)基為...
學(xué)術(shù)大菜菜 2025-06-08 02:59
微生物 BL21大腸桿菌蛋白表達(dá)
分別加入IPTG使?jié)舛?.2mM、0.4mM、0.6mM,培養(yǎng)過夜,測od600nm,數(shù)值沒有對照高,這是什么情況?
橘子味味味兒 2025-05-27 12:00
休閑灌水 BL21大腸桿菌蛋白表達(dá)
分別加入IPTG使?jié)舛?.2mM、0.4mM、0.6mM,培養(yǎng)過夜,測od600nm,數(shù)值沒有對照高,這是什么情況?
橘子味味味兒 2025-05-27 01:32
分子生物 CCK8實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
孵育時(shí)間控制:常規(guī)孵育1-4小時(shí),每隔2小時(shí)檢測吸光度,OD值控制在1.0左右為宜。顯色不足或過久均影響結(jié)果準(zhǔn)確性...2.儀器校準(zhǔn):酶標(biāo)儀檢測波長建議450nm,雙波長檢測可選參考波長600-650nm。...
夏末~易科 2025-04-22 02:48
分子生物 關(guān)于大腸桿菌感受態(tài)的制作
做感受態(tài)時(shí)會(huì)使用分光光度計(jì)測od600,在1%接種量下,有peccas質(zhì)粒的菌長四個(gè)小時(shí)才能長到0.4左右。我想問一下這個(gè)速度是正常的嗎?長兩個(gè)小時(shí)左右給師兄師姐看——他們都是要兩個(gè)小時(shí)就做不...
owihzgnahz 2024-10-18 03:34
微生物 各位大神,求助大腸桿菌發(fā)酵補(bǔ)料C/N比,誘導(dǎo)后什么時(shí)候開始補(bǔ)料...
大腸桿菌(工程菌)發(fā)酵:10L罐發(fā)酵,配料5L,OD600值10左右開始IPTG誘導(dǎo)(4h左右),3h溶氧開始反彈補(bǔ)糖,誘導(dǎo)后開始補(bǔ)氮源(蛋白胨,酵母膏);糖聯(lián)動(dòng)DO,氮源勻速補(bǔ)料,24h放罐。問題:1....
fengyue518 2024-09-21 08:18
生物科學(xué) 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化利福平常見問題分析
同時(shí)也影響EHA105的終濃度(在LK50中添加20ug/ml的利福平可以將EHA105的生長時(shí)間延遲7h,終濃度從OD600=6.42降到5.22,在LK50中添加50ug/ml的利福平可以將EHA105的生長時(shí)間延遲11h,終濃度...
2nd lab 2024-07-30 05:03
醫(yī)學(xué) 科研干貨|13種蛋白提取方法,趕快收藏手慢無!
2測OD600約1.0。3100ml過夜培養(yǎng)物,1000g,離心,5min,4℃。4棄上清,重懸于80ul抽提buffer:0.1MTris-Cl(PH7.5),0.2MNaCl,0.01Mβ-ME,20%甘油,5mMEDTA,1mMPMSF。(100×)MSF0.1742g溶于10ml...
科研蟲子小助手 2024-07-17 02:10
醫(yī)學(xué) 科研干貨|13種蛋白提取方法,趕快收藏手慢無!
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科研蟲子小助手 2024-07-12 03:42
地學(xué) 劉乾靈:微生物礦化封堵巖體微裂隙降滲機(jī)制研究
(e)為微生物礦化封堵過程中裂隙導(dǎo)水系數(shù)下降示意曲線圖4不同微生物漿液濃度以及隙寬對裂隙封堵模式的影響圖5不同微生物漿液濃度反應(yīng)生成的礦化絮狀物顯微拍攝及粒徑分布:(a)OD600=1.2;...
yexuqing 2024-07-12 02:10
生物科學(xué) 細(xì)菌丙二醛(MDA)檢測求助
我想測銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌的脂質(zhì)過氧化水平,所以想用TBA...2.取0.4ml經(jīng)離心分離的發(fā)酵上清液,加0.4ml0.6%TBA在95℃金屬浴40min,檢測OD600,532,450。計(jì)算結(jié)果為負(fù)值。請問為啥呀?
快叫爸爸666 2024-07-11 02:12
生物科學(xué) 干貨分享|一文講透酶標(biāo)儀可提供的檢測項(xiàng)目,值得收藏!
檢測單位用OD值表示,OD是opticaldelnsity(光密度)的縮寫,表示被檢測物吸收掉的光密度,OD=10...CCK-8:測定450nm吸光度:建議采用雙波長進(jìn)行測定,檢測波長450-490nm,參比波長600-650nm。...
MDL實(shí)驗(yàn)室 2024-06-03 03:01
生物科學(xué) 干貨分享|一文講透酶標(biāo)儀可提供的檢測項(xiàng)目,值得收藏!
檢測單位用OD值表示,OD是opticaldelnsity(光密度)的縮寫,表示被檢測物吸收掉的光密度,OD=10...CCK-8:測定450nm吸光度:建議采用雙波長進(jìn)行測定,檢測波長450-490nm,參比波長600-650nm。...
科研實(shí)驗(yàn)_研實(shí) 2024-05-08 02:27
醫(yī)學(xué) 原核蛋白表達(dá)的整體實(shí)驗(yàn)流程和具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.2.2次日按1:100接種于50μg/mlKan的30mlLB培養(yǎng)液中,37℃220rpm振搖至菌體OD600為0.4(約2h);2.2.3取出1ml培養(yǎng)物,12000g室溫離心2min,棄上清,用100μl1×上樣緩沖液重懸菌體沉淀;2.2...
超困困狗g 2024-05-06 06:00
微生物 雙歧桿菌
雙歧桿菌od600值是0.1,菌群濃度大概是多少啊
陳一二三 2024-04-10 08:50
生物科學(xué) 實(shí)驗(yàn)技能分享|載體構(gòu)建及原核表達(dá)
OD600=0.6-0.8時(shí),取1mL菌液作為未誘導(dǎo)全菌樣品對比,并向剩余菌液中加入終濃度為0.5mM的IPTG,置于搖床上低溫180rpm誘導(dǎo)過夜。3.3超聲破碎菌液a.從過夜誘導(dǎo)后的菌液中取1mL作為誘導(dǎo)后全...
科研狗的日常吖 2024-02-29 10:00
微生物 求助
測定嗜酸乳桿菌的OD600,過程中吸光度超過1需要稀釋是用去離子水還是培養(yǎng)基稀釋?測定其pH,要稀釋是用去離子水還是培養(yǎng)基?
環(huán)境考研2023 2024-01-23 08:43
微生物 菌液與電導(dǎo)率
我最近在做菌液電導(dǎo)率的實(shí)驗(yàn),做的是大腸桿菌,還打算做金黃色葡萄球菌,用的是5%葡萄糖溶液做的菌懸,OD600=1,取5ml菌懸液在15ml的離心管中,37度120rpm振蕩培養(yǎng)兩個(gè)小時(shí)后,空白對照組的...
周西西a 2023-11-16 12:49
微生物 希瓦氏菌培養(yǎng)
我的希瓦氏菌老是養(yǎng)不好,養(yǎng)了一個(gè)多月了,其中就出現(xiàn)一次比較好的平板...另外,用OD600去測希瓦氏菌(酶標(biāo)儀測的)也沒辦法看出培養(yǎng)后的區(qū)別,求求解決辦法。培養(yǎng)基均為TSA培養(yǎng)基,溫度30℃。
子川26 2023-10-11 02:48
微生物 發(fā)酵自溶原因有哪些
排除染菌,大腸桿菌高密度發(fā)酵過程中,在誘導(dǎo)4-5小時(shí)后溶氧開始掉到負(fù)數(shù),但是其他參數(shù)正常,OD600也在上漲,誘導(dǎo)7-8小時(shí)后OD600下降,自溶,發(fā)酵液顏色略微偏綠,是因?yàn)槿毖鯇?dǎo)致的嗎?
嘿嘿哈哈工 2023-09-05 01:22
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