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ashelychan木蟲 (小有名氣)
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[交流]
同樣的培養(yǎng)條件，為什么菌的生長速度出現(xiàn)了很大的差異？
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大俠們，請幫忙，我的實驗碰到了問題，這個坎過不去，接下去的實驗就做不了。本人明年6月份就該研究生畢業(yè)了，現(xiàn)在非常著急，十萬分之火急。 我有一株菌A，培養(yǎng)條件為無機鹽基礎(chǔ)培養(yǎng)基+0.25%葡萄糖、30℃、180 r/min，以前一直這么培養(yǎng)，每次培養(yǎng)到12h左右時菌體的OD600僅為0.2-0.3左右，而且葡萄糖能夠被完全利用完，葡萄糖利用完后所測的pH值在6.0左右。重復(fù)了2年同樣的手段，菌株的生長情況一直是這樣沒有發(fā)生太大變化。但是從今年4月份開始之后，發(fā)現(xiàn)菌體的生長情況發(fā)生了很大的改變�，F(xiàn)在采用相同的手段，菌株培養(yǎng)6h時OD600就瘋長到0.8，而且葡萄糖沒辦法被全部利用完，這個時候測的pH值則遠(yuǎn)低于原來的6。原本懷疑是染雜菌了，但是鏡檢沒有發(fā)現(xiàn)任何異常。我的這株菌具有降解某種農(nóng)藥的能力，對它的這種降解能力進行檢驗，也是正常的。急死我了，這兩個月找了無數(shù)次原因，都沒能解決。將菌種庫保存的原始菌株活化出來進行培養(yǎng)，出現(xiàn)相同的瘋長現(xiàn)象。我這株菌率屬于惡臭假單胞菌，所以取了菌種庫里的模式菌KT2440進行培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)KT2440也出現(xiàn)這種瘋長現(xiàn)象（以前對KT2440進行培養(yǎng)沒有出現(xiàn)過這種瘋長現(xiàn)象）。將里面的各種培養(yǎng)基成分都換成新的、原來公司出產(chǎn)的，還是出現(xiàn)一樣的問題。把溫度和轉(zhuǎn)速更加嚴(yán)格的調(diào)整，保證其變化幅度不大且跟原來的一樣，還是不能解決這一問題。將里面的葡萄糖換成不同公司和原來公司的，除了一次未開封的原來公司的試劑出現(xiàn)最初的正常情況，其他公司的和原來公司但已經(jīng)開封用過的葡萄糖還是出現(xiàn)這種瘋長的不正常情況。請問，這是怎么回事？我該怎么辦？是葡萄糖里摻雜了其他雜質(zhì)，還是其他什么原因？有沒有人碰到這種情況？大俠們都是怎么解決的？跪求解決之道。 |
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ashelychan
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沒有進行菌落平板計數(shù)。這里，長多了不好，這樣就沒法重復(fù)出原來的結(jié)果，而且接下來要做的實驗與它的生長速度密切相關(guān)，必須是原來的速度才行。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2016-06-06 00:08:52
liminwu2008
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4樓2016-06-06 00:46:44
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活化后用的培養(yǎng)基配方跟原來還是一樣的。原來認(rèn)為培養(yǎng)基成分出問題，所以就將每種試劑都換成新的，但是還是出現(xiàn)這個問題。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2016-06-06 09:08:54
ashelychan
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沒有進行菌落平板計數(shù)。這里，長多了不好，這樣就沒法重復(fù)出原來的結(jié)果，而且接下來要做的實驗與它的生長速度密切相關(guān)，必須是原來的速度才行。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
6樓2016-06-06 09:09:21
g1107780254
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首先：ph比原來低，od比原來高，說明確實比原來長的好。按照你說法不是原料問題，不是菌種問題，不是工藝問題。但從結(jié)果看，培養(yǎng)基成份肯定發(fā)生變化了。我的建議是看看你的滅菌鍋是不是發(fā)生問題了？糖對溫度比較敏感。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
7樓2016-06-06 11:44:58
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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如果不對應(yīng)的話，樓主應(yīng)該早有發(fā)現(xiàn)…應(yīng)該不是這方面的原因… 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
9樓2016-06-06 23:01:36
clark2010
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10樓2016-06-07 04:42:50
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