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往陽光多處走新蟲 (小有名氣)
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[求助]
高保真酶怎么就跑不出呢 已有4人參與
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我想問一下，我條帶700左右，跑PCR ，普通的Taq 酶可以跑出條帶，可是用高保真酶(寶生物)的就是跑不出來，也跑過梯度PCR ，也用普通酶跑去測過序，只是500多的時候突變成了終止密碼止，這個證明了我引物是不錯的，因為前面的序列比對都是對的。我想問一下，到底是哪里出了問題，讓我跑了好幾個月都沒跑出來的原因。 @biostar2009 @飛約瘋?cè)嗽?/u> @wizardfan @youlinglyw 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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2樓2017-03-10 15:49:55
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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有的高保真就不怎么樣。推薦一款primestar gxl的，很給力。還有一個辦法，用普通taq做五個獨立反應(yīng)，跑20個左右的cycle，全測序，運氣好的話，可能有沒突變的。之前我也成功過 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
3樓2017-03-10 16:17:12
jurkat.1640
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6樓2017-09-01 15:13:00
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