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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » PCR相關 » pcr
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青檸檬PCR新蟲 (正式寫手)
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[求助]
pcr 已有1人參與
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想問下有沒有人在設計引物時，以環(huán)裝質粒為模板6300bp，幾乎要擴增下來整個片段，然后引物r為61bp，gc含量62.3%，Tm99.8，f為41bp，gc含量53.7%，Tm86，然后用了高保真和pcr enhancer，結果有個1300左右的條帶， 想問下是什么問題 @biostar2009 @飛約瘋人院 @wizardfan @youlinglyw 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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10樓2018-07-28 00:22:25
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為什么要搞這么長的引物？都是特異匹配的嗎？以環(huán)狀質粒做定點突變，也是要擴增下整個質粒。并不難。你再摸索一下條件吧，1300說明引物退火到非目的序列了 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2018-07-27 23:55:29
青檸檬PCR
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3樓2018-07-28 00:00:35
青檸檬PCR
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4樓2018-07-28 00:01:13
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