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xiao杉兒金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
肝微粒體實(shí)驗(yàn)中代謝穩(wěn)定性問(wèn)題 已有3人參與
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懇請(qǐng)各位大神幫幫忙！！ 本人現(xiàn)在在做一個(gè)單一成分的肝微粒體體外代謝實(shí)驗(yàn) 情況一：孵育時(shí)間考察中，發(fā)現(xiàn)其代謝穩(wěn)定性很亂，用大鼠肝微粒體做，底物濃度（20uM），蛋白濃度0.5 mg/ml，設(shè)0-120min的孵育時(shí)間，最終有時(shí)能降20~30%，有時(shí)又只有百分之幾的變化，且中間有的點(diǎn)不降反增。 情況二：選了某次穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)中代謝了15%的時(shí)間點(diǎn)（30min），蛋白濃度（0.75mg/ml，已考察）做底物濃度的考察，發(fā)現(xiàn)中間仍有某些點(diǎn)沒(méi)有規(guī)律性的變化，但各濃度點(diǎn)有代謝30~40%，排除這些點(diǎn)后總體的代謝速率在上升，且呈線性。 情況三：選用上述在線性范圍內(nèi)的某底物濃度（60uM），再次用大鼠肝微粒體做代謝穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)代謝依然不穩(wěn)定，重做，在60min時(shí)也只有百分之幾的代謝。 現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)一直停滯不前了，按篩選出的條件做得不到前面實(shí)驗(yàn)的結(jié)果（如與孵育時(shí)間和底物濃度實(shí)驗(yàn)代謝情況比 ），請(qǐng)各位大神不吝賜教，謝謝！�。。� |
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10樓2019-06-24 11:11:50
taxue314
新蟲(chóng) (初入文壇)
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2樓2015-09-07 17:18:36
3樓2015-09-11 10:23:27
xiao杉兒
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4樓2015-09-14 20:04:13
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