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與PMD-19T連接問(wèn)題 已有6人參與
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| 用PMD-19T載體與我的目的基因片段（3.3kb）鏈接，之前用高保真酶進(jìn)行PCR擴(kuò)增后通過(guò)加A試劑盒進(jìn)行加A尾，之后熱擊轉(zhuǎn)化，涂布后長(zhǎng)出菌落，但是提質(zhì)粒鑒定后發(fā)現(xiàn)載體自連（單雙酶切條帶一樣，只有一條，有一個(gè)不一樣的，但單切有出現(xiàn)兩條條帶）；后來(lái)用一步克隆試劑盒進(jìn)行連接，但涂布后沒(méi)有菌落，一直不知道是什么原因，請(qǐng)高人指教··· |
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