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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 生物化學 » 分子生物學、蛋白表達
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[求助]
分子生物學、蛋白表達 已有3人參與
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求助各位大神，最近用BL21表達pET系列重組質粒，用溶菌酶破碎細菌，但是離心之后，SDS-PAGE電泳結果顯示上清沒有蛋白條帶，沉淀里有，課題組的師兄師姐的又沒有問題，這是什么情況啊？感謝各位的指點  |
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12樓2018-02-27 18:16:14
匿名
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2樓2018-01-12 17:30:44
ksws0465326
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【答案】應助回帖
★ ★
感謝參與，應助指數(shù) +1
西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2018-02-22 08:15:21
感謝參與，應助指數(shù) +1
西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2018-02-22 08:15:21
| 你反應的條件是啥，LB？還是M9？還是別的，溫度，誘導條件（IPTG濃度，誘導時間）每個樣本都可能不一樣，要具體看，如果是30度培養(yǎng)誘導3小時，可以降低到16到18度，誘導24小時，還有IPTG濃度，從高到低0.6-0.1等，除了這些，培養(yǎng)基也有好些種，每種也不一樣。此外，BL21之外還可以用其他的菌株（Rosetta 2），本身DH5a也可以試一試。如果不行，再換載體，pET15，21，28等等�？傊�，需要條件摸索 |
3樓2018-01-12 18:10:05
4樓2018-01-12 20:35:27
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