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靜默人聲412木蟲 (小有名氣)
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[求助]
提取土壤DNA,DNA電泳有條帶,就是PCR結(jié)果不出條帶 已有3人參與
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用氨氧化細(xì)菌特異性引物,amoA_1F,amoA-2R, 擴(kuò)增氨氧化細(xì)菌amoA基因,但是擴(kuò)不出來,沒有結(jié)果。 我使用的寶生物的冷啟動(dòng)taq酶 ,每個(gè)反應(yīng)體系加0.25ul酶,0.4ul引物,五個(gè)反應(yīng)體系融合后,再分裝,依據(jù)taq酶說明書設(shè)計(jì)的PCR反應(yīng)過程,98,10s;55,30s,721min.40個(gè)循環(huán)。 哪位大神能幫我分析一下! 之前引物是每個(gè)2ul,引物二聚體過多,后稀釋5倍。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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同學(xué),你的問題解決了嗎?我最近也遇到了同樣的問題,稀釋了DNA.還是沒有條帶,能不能給個(gè)建議呀! 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
至尊木蟲 (著名寫手)
木蟲 (正式寫手)
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土壤dna提取出來你純化了嗎?里面可能含有腐殖酸,會(huì)影響pcr。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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