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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » DNA重組 » 雙酶切連接不成功
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雙酶切連接不成功 已有7人參與
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雙酶切連接這么難嗎，怎么就連不上！目的片段3300，載體3000，酶是NEB的。,雙酶切后10ulT4連接體系，體積比設了好幾個，轉化子長了好多，挑菌，菌液PCR都是假陽性，欲哭無淚( ˙-˙ )，該怎么辦？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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wangxiaoguo
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第二，酶切和連接時間最好長一些。一般雙酶切出現(xiàn)假陽性的話，很可能是酶切不是很完全。如果兩個酶位點太近的話會有位置效應的。另外，確認一下你檢測的引物是唯一的。要不可能會出現(xiàn)擴增的并不是目的片段長度，但實際上確連好了 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
我好暴躁啊
15樓2017-05-31 22:15:16
2樓2017-05-30 22:01:09
3樓2017-05-30 22:13:28
kangaroo0513
新蟲 (正式寫手)
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4樓2017-05-30 22:32:27
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