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如何提取鏈霉菌基因組 已有2人參與
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提了一個月了,還沒提出來。求大神指導。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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我用的CTAB法,先用溶菌酶溶了兩到三個小時,再加入10%的SDS30分鐘,再加入CTAB抽提液65℃50分鐘,再加入酚氯仿異戊醇25:24:1,離心取上清,加入異丙醇,放在-20冰箱,一段時間后,離心倒上清,用水溶解沉淀。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |



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我大提的時間手動提的:加溶菌酶37度1h 酶可以多加點 加入10%的sds至終濃度2% 65度水浴10min 冷卻至室溫 加蛋白酶k 37度1h 加5M的NaClO4至終濃度1M 加苯酚氯仿異戊醇抽提3-4次 至界面無明顯白膜為止 加Rna酶 37度1h 用氯仿異戊醇抽提2-3次(無苯酚) 加入1/10體積的NaAC和等體積預冷異丙醇 用干凈玻璃棒沿一個方向攪動 棒上會有白色絲狀dna 70%乙醇4度過夜洗鹽 風干后溶于0.1xSSC 過程中混勻等動作要輕微 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |

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