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[求助] 求小分子量蛋白做western blot的方法和經(jīng)驗(yàn)～

目標(biāo)蛋白5-10KD，知道肯定有表達(dá)，但是做了western檢測(cè)不到，感覺(jué)是方法不合適，比如電壓，時(shí)間等沒(méi)掌握好，希望做過(guò)的蟲(chóng)友給一些建議，謝謝～

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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2018-05-15 07:52:35

主要還是膜的問(wèn)題，您看以查一下跑小蛋白時(shí)膠的類型。。其他的方法不變�？赡荜P(guān)鍵在于您的膠有問(wèn)題

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3樓2018-05-14 13:20:58

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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2018-05-15 07:52:51

做小分子的蛋白，需要用濃度比較高的膠，比如15%，或是連續(xù)梯度的的比如4-20%的膠。轉(zhuǎn)膜時(shí)，膜的孔徑用0.22的，因小分子容易轉(zhuǎn)穿。

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5樓2018-05-14 20:27:17

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3樓: Originally posted by Jack1508 at 2018-05-14 13:20:58
主要還是膜的問(wèn)題，您看以查一下跑小蛋白時(shí)膠的類型。。其他的方法不變�？赡荜P(guān)鍵在于您的膠有問(wèn)題

用的就是tris膠，濃度是15%

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6樓2018-05-14 23:29:33

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引用回帖:

用的就是tris膠，濃度是15%

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7樓2018-05-14 23:29:49

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4樓: Originally posted by 美億美生物 at 2018-05-14 15:02:51
這個(gè)，還是要多跑幾次呀

已經(jīng)跑了幾次了

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8樓2018-05-14 23:34:01

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5樓: Originally posted by 冰之雪域 at 2018-05-14 20:27:17
做小分子的蛋白，需要用濃度比較高的膠，比如15%，或是連續(xù)梯度的的比如4-20%的膠。轉(zhuǎn)膜時(shí)，膜的孔徑用0.22的，因小分子容易轉(zhuǎn)穿。

好，會(huì)注意下，謝謝

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9樓2018-05-14 23:56:35

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2樓: Originally posted by star013 at 2018-05-14 12:12:15
我們可以做wb技術(shù)服務(wù)哈

可以的話，可以交流下哈～

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10樓2018-05-14 23:57:11

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