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關Q想畢業(yè)新蟲 (小有名氣)
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pMD19-T載體連接,怎么都連接不上是怎么回事?求大神 已有6人參與
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我的目的片段36Kb左右,用的酶是TaKaRa的PreMix Taq,連接體系是1μl19-T,1.5μl回收產物,2.5μl水,5μlSolution Ⅰ,16°C,30分鐘,轉入DH5α感受態(tài),然后用氨芐板篩,然后做菌液pcr。 同一株困用19-T的通用引物P一遍,用我自己目的基因的特異引物P一遍,我挑了50個菌落,什么都沒有P出來,不管是T載體的還是我自己目的基因的,都沒有P出來,請問大神們是哪里出了問題? 還有一個問題想請教,我看這個19-T載體的說明書說什么藍白菌落的,我怎么沒有遇到,還有和19-T載體裝在一起的那個Control Insert是什么,我的體系里沒有正常嗎? @youlinglyw 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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