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17621933862新蟲 (小有名氣)
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有沒有大牛P過不連續(xù)的基因片段，做克隆用的，一直P不出來 已有5人參與
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有沒有大牛P過不連續(xù)的基因片段，做克隆用的，一直P不出來，研二了，完整的克隆都還沒學(xué)會(huì) 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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2樓2018-09-30 08:58:40
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要克隆全長(zhǎng)做蛋白表達(dá)，可是庫里沒有全長(zhǎng)基因，就算內(nèi)含子剪切掉了，也沒有全長(zhǎng)，也不知道哪塊表達(dá)有我要的蛋白功能！ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2018-10-02 21:45:17
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6樓2018-10-02 22:20:28
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8樓2018-10-03 23:29:40
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對(duì)，就是把庫里的序列在ORF 那個(gè)軟件里比對(duì)了，結(jié)果沒有找到起始密碼子，可能在庫里非編碼區(qū)，測(cè)序的結(jié)果可能有差異，也只有有RACE了，不過這個(gè)試劑盒很貴的，想了解一下有誰用過，能不能從pcr開始用，前面逆轉(zhuǎn)錄用自己的試劑盒？還有就是我要是做多克隆抗體的話，我是不是就不用克隆全長(zhǎng)了，我找到一個(gè)抗原決定簇就可以了吧，如何找到這個(gè)呢，求助呀？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
9樓2018-10-03 23:34:36
張凡云
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2018-10-04 22:39:09
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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2018-10-04 22:39:09
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我的手段是，分段克隆，然后通過融合PCR進(jìn)行拼接，我的基因是1500bp，分為3個(gè)片段，還是算比較容易的 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
10樓2018-10-04 01:36:00
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