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秋犯銀蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
求助-土壤微生物的獲取及確定其生長(zhǎng)曲線 已有1人參與
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實(shí)驗(yàn)需要從土壤中提取微生物，做生長(zhǎng)曲線確定達(dá)到對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的時(shí)間。 但是，目前培養(yǎng)的微生物幾乎不長(zhǎng)，OD值很小，沒(méi)有理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 第一次做微生物實(shí)驗(yàn)，很多地方不懂，以下是實(shí)驗(yàn)過(guò)程，請(qǐng)大家看一下有沒(méi)有錯(cuò)誤的。 20g土壤+100ml純水震蕩一晚上，取懸濁液標(biāo)記為10^-1 稀釋至10^-2、10^-3、10^-4 取以上不同梯度的菌液5ml ，加到100ml培養(yǎng)基中（培養(yǎng)基主要成分為葡萄糖、蛋白胨少量，以及一些無(wú)機(jī)元素） 在37℃，60rpm震蕩培養(yǎng)，每隔1h拿出來(lái)OD600。 目前做過(guò)兩次實(shí)驗(yàn)，OD值一直在0.005-0.011，還有負(fù)值。 |
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竟然有負(fù)值，我覺(jué)得可能是你紫外操作有問(wèn)題，而且培養(yǎng)時(shí)間短現(xiàn)象不明顯。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
2樓2018-11-27 11:59:53
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分光光度計(jì)操作應(yīng)該沒(méi)問(wèn)題，上次做了這幾個(gè)時(shí)間點(diǎn) 0h 2h 3.5h 6h 20h 0.05 0.057 0.105 0.023 0.017 -0.009 0.007 0.009 0.006 0.005 之前用的一臺(tái)新的分光光度計(jì)，吸光度一直跳，較不到零點(diǎn)，后來(lái)?yè)Q老的還好點(diǎn)。 懷疑沒(méi)從土壤里面提取到微生物，或者培養(yǎng)基不合適 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
3樓2018-11-27 12:10:33
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4樓2018-11-27 12:57:09
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5樓2018-11-27 14:44:47
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土層深度是多少？可以先在平板上培養(yǎng)土粒，看看都有那些菌建議增長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
6樓2018-11-29 15:59:28
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15cm附近，不是很精確的采的。我的培養(yǎng)基滅完菌后有顏色，對(duì)od600的測(cè)定有影響嗎，還有看網(wǎng)上說(shuō)看到一般是用od600，這個(gè)波長(zhǎng)一定合適嗎。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
7樓2018-11-29 17:14:37
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有點(diǎn)顏色沒(méi)關(guān)系，當(dāng)你養(yǎng)起來(lái)時(shí)候很明顯是渾濁的，肉眼可分的，先看能不能長(zhǎng)在分離純培養(yǎng)測(cè)曲線。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
8樓2018-12-01 14:58:35
祁徹徹
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9樓2018-12-05 09:01:46
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