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梧桐柒夕主管區(qū)長(zhǎng) (文壇精英)
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[求助]
大腸桿菌基因組提取時(shí)A260/280比值小于1.7，怎么可以使比值升高？
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| 提取方法中采用蛋白酶K溫育，10~60min都已嘗試，且酶量為40微的10mg/ml，實(shí)驗(yàn)中采用磁球進(jìn)行DNA吸附，洗脫，電泳。電泳圖很干凈，確定是基因組。但用K5500測(cè)得比值偏低，同時(shí)A260/230比值低于1.求諸位大神指導(dǎo)。 |
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 核酸生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) |
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cicelyzh
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梧桐柒夕: 金幣+5, ★★★很有幫助 2013-11-10 18:25:46
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梧桐柒夕: 金幣+5, ★★★很有幫助 2013-11-10 18:25:46
| A260/280低說(shuō)明有蛋白雜質(zhì)污染。蛋白酶K作用不是除蛋白，是去掉核酸酶活性的。實(shí)在不行的話，用酚氯仿抽提后再吸附。A260/230低是因?yàn)橛杏袡C(jī)試劑污染，可能是洗滌時(shí)的酒精殘余。可以讓酒精揮發(fā)一會(huì)后再洗脫。 |
2樓2013-11-10 04:54:08
梧桐柒夕
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3樓2013-11-10 12:39:39
cicelyzh
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4樓2013-11-10 13:00:59
梧桐柒夕
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