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喵喵咪吖新蟲 (小有名氣)
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[求助]
PET28a重組質(zhì)粒構(gòu)建求助 已有5人參與
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請(qǐng)教萬(wàn)能的蟲子們,我最近在構(gòu)建PET28a重組質(zhì)粒,目的基因1200左右,之前的pcr和酶切膠回收沒有問(wèn)題,回收之后跑膠觀察亮度大概3:1,亮度很亮,構(gòu)建體系是10ul,1ulbuffer,1ulT4連接酶,各4ul酶切產(chǎn)物,室溫連接30min涂板過(guò)夜,無(wú)菌生長(zhǎng);第二次,網(wǎng)上看到濃度不能過(guò)高,稀釋一倍,按原體系加入,室溫連接1h,恢復(fù),涂板過(guò)夜,無(wú)菌生長(zhǎng)。請(qǐng)問(wèn)大家,其中是否有什么問(wèn)題?非常感謝! @biostar2009 @youlinglyw @wizardfan @飛約瘋?cè)嗽?/u> 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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