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vanessa_324鐵蟲 (初入文壇)
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[交流]
求助!如何把兩個(gè)4K的片段連起來啊? 已有6人參與
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我現(xiàn)在在構(gòu)建一種病毒的重組質(zhì)粒,由于長度太長,需要分段擴(kuò)增再拼接起來。 現(xiàn)在已獲得兩個(gè)4K的片段,想咨詢一下,有沒有同門之前拼接過這么長的片段?是用什么方法呢? 兩個(gè)片段:第一個(gè)片段,5‘端有一個(gè)KPNI位點(diǎn),3’端有SalI 位點(diǎn);第二個(gè)片段,5‘有SalI位點(diǎn),3’有NhelI位點(diǎn) 想過直接用酶連接,可是應(yīng)該效率很低 想過用overlap pcr,但是長度好像受限制 |
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