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[求助]
用Tris飽和酚提取細菌DNA，加進去飽和酚一下子變紅，為啥呢？ 已有1人參與
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如題，用Tris飽和酚提取細菌DNA，加進去飽和酚一下子變紅，之前是淡黃色的我確定沒有被氧化。也就是說菌液(已經(jīng)用溶菌酶和SDS處理過了)氧化性很強，把Tris氧化了？有人可以推測出到底是啥氧化的它么？是核酸，菌內(nèi)的蛋白還是？菌是腸道厭氧菌！ 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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4樓2017-07-30 10:48:30
【答案】應助回帖
感謝參與，應助指數(shù) +1
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1、紅色說明已經(jīng)氧化了，即使你沒打開過的，也可能這樣。我們實驗室去年就發(fā)生過沒打開過的酚，變成紅色，用這種酚，提核酸效果很差！ 2、一般與氯仿混合后要放置過夜后溶液會澄清，這樣就可以用了。 關于溶液變色，是因為酚被氧化了。飽和酚里面應該有八羥基奎啉，這樣酚就不會被氧化。 3、飽和酚和氯仿混合后混濁，是正常的，但是應該等到澄清了之后才使用。而且為了放置氧化，在取了等量的飽和酚與氯仿混合之后，適當加入一定的飽和酚上層的tris－HCl，起到隔絕空氣避免氧化的作用。如果你不等待澄清分層，那么去吸取的溶液就含有部分tris-hcl了。 |
2樓2017-07-30 10:02:14
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不不，您誤會了我的意思，Tris飽和酚剛買的，沒有變性，也沒有被氧化。是加到樣本里突然就變紅了，是樣本的作用。我想問是不是樣本里面有什么成分具有強大的氧化特性。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
3樓2017-07-30 10:33:57
5樓2017-07-30 10:51:35
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