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皮蛋同學(xué)新蟲 (小有名氣)
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量子點(diǎn)與DNA怎么連接？以及怎樣表征？ 已有1人參與
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本人在做羧基修飾量子點(diǎn)和氨基修飾DNA的連接，看了文獻(xiàn)有些不一樣的方法，現(xiàn)在遇到以下問題，希望大神們指導(dǎo)。實(shí)驗(yàn)室沒有師兄師姐做過(guò)量子點(diǎn)，時(shí)間緊迫，如能幫助，萬(wàn)分感激 1. 量子點(diǎn)與DNA連接的方法。要不要用EDC和NHS激活，連接后要不要用乙醇胺封閉沒有完全結(jié)合的量子點(diǎn)上的羧基？以及他們的用量及反應(yīng)時(shí)間。（我用的1mM的EDC和NHS，激活，10mM的乙醇胺） 2. 連接攪拌多少小時(shí)，需要4度嗎 3. 如何去除未連接上的DNA。我看文獻(xiàn)里有直接離心的，我嘗試13300rpm, 30分鐘離心，只離心下來(lái)很少一部分（實(shí)驗(yàn)室4度離心機(jī)最高轉(zhuǎn)速13300）。我看還有文獻(xiàn)是用超濾離心管的，沒用過(guò)這個(gè)東西，我們實(shí)驗(yàn)室能離心超濾管的4度離心機(jī)，最高轉(zhuǎn)速只有6000，我離心20分鐘后，發(fā)現(xiàn)啊濾膜上的液體全部被甩下來(lái)，量子點(diǎn)被甩在濾膜上了，弄不下來(lái)。據(jù)做蛋白的師姐說(shuō)說(shuō)正常的應(yīng)該是濾膜上也有液體的啊。而且濾膜上面的空間這么小，移液槍的槍頭都伸不進(jìn)去，怎么把上層液體弄出來(lái)呢。 |
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