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關(guān)Q想畢業(yè)新蟲 (小有名氣)
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pMD19-T載體連接，怎么都連接不上是怎么回事？求大神 已有6人參與
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我的目的片段36Kb左右，用的酶是TaKaRa的PreMix Taq，連接體系是1μl19-T，1.5μl回收產(chǎn)物，2.5μl水，5μlSolution Ⅰ，16°C，30分鐘，轉(zhuǎn)入DH5α感受態(tài)，然后用氨芐板篩，然后做菌液pcr。 同一株困用19-T的通用引物P一遍，用我自己目的基因的特異引物P一遍，我挑了50個菌落，什么都沒有P出來，不管是T載體的還是我自己目的基因的，都沒有P出來，請問大神們是哪里出了問題？ 還有一個問題想請教，我看這個19-T載體的說明書說什么藍白菌落的，我怎么沒有遇到，還有和19-T載體裝在一起的那個Control Insert是什么，我的體系里沒有正常嗎？ @youlinglyw 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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3樓2018-08-06 10:12:22
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4樓2018-08-06 10:49:50
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