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[求助]
用DNS法總測不出酶活 已有2人參與
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我用的是以CMC-Na為底物的液體發(fā)酵培養(yǎng)基。取發(fā)酵液，10000轉(zhuǎn)左右離心5分鐘作為粗酶液。0.5ml粗酶液+1.5mlPH4.8的乙酸乙酸鈉緩沖溶液，反應(yīng)時(shí)間1h，溫度50度。對照是粗酶液沸水浴五分鐘。最后DNS1.5ml，沸水浴五分鐘。540nm測吸光度，結(jié)果幾乎為零，還會出現(xiàn)負(fù)值。DNS做標(biāo)線也沒出現(xiàn)問題。求指導(dǎo) 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
6樓2017-06-01 00:22:34
2樓2017-05-23 11:37:15
3樓2017-05-23 16:48:15
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我是用濾紙為底物篩出來的降解菌。測酶活時(shí)分別用CMC和濾紙為底物，測CMC酶活和濾紙酶活。測出來幾乎為零。還有一個問題，我如果在做空白組時(shí)，加入DNS后再加粗酶液理論上可行嗎？我這樣試了下空白的顏色不那么深了，結(jié)果能提高點(diǎn)。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
4樓2017-05-23 23:48:59
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