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大頭妞妞新蟲 (小有名氣)
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[求助]
求大神指導(dǎo)熒光定量中絕對(duì)定量靈敏度的問題 已有1人參與
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本人用的師姐的引物、引物都OK、體系也OK、換算的拷貝數(shù)也沒問題、但是再高的靈敏度我實(shí)在做不下去了、我想請(qǐng)問一下、是否有引物不同做出來的靈敏度就不同這個(gè)說法、我目前只能做到9.95??10的3次方拷貝、目標(biāo)片段150bp,用的18T載體、SYBR染料法做的、20ul 體系、文章中有做我這方面的人家PCR就可以靈敏度達(dá)到我這個(gè)級(jí)別、想想到最后我都做的啥啊、求大神指導(dǎo)、第二張圖、上不去的溶解曲線分別是我的2次方拷貝和水、因?yàn)榍�上不去、所以這個(gè)值就沒法要、其他的都還好、我的這個(gè)曲線都還可以、求指導(dǎo)啊 @biostar2009 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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矮腿妹的煩惱
新蟲 (初入文壇)
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6樓2017-06-09 21:40:46
sherlock0088
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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2017-06-10 23:27:10
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一般來說不同的引物不同的擴(kuò)增效率，上不去的原因是Ct太高，沒到平臺(tái)期擴(kuò)增就結(jié)束了。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2017-06-09 08:19:02
大頭妞妞
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3樓2017-06-09 15:01:23
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4樓2017-06-09 15:23:30
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