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TA克隆連接方向問題，實(shí)驗(yàn)室小白，求大神們指教！ 已有4人參與
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TA連接方向問題。我用pMD19T simple 和帶有BamH1和Hind3的PCR產(chǎn)物鏈接，怎么驗(yàn)證它的連接方向呢？ 我接下來要連接到pET-32a 上表達(dá)，已經(jīng)確定用這兩個(gè)酶切位點(diǎn)可以正向連在pET-32a上了，還需要驗(yàn)證PCR產(chǎn)物在克隆載體上的方向嗎？ @youlinglyw 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
回復(fù)此樓» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
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還有一點(diǎn)不明白，為什么要驗(yàn)證方向呢？切下來后不連在表達(dá)載體上一樣嗎？我的理論基礎(chǔ)有些差，還請(qǐng)多指教。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
6樓2017-06-09 10:10:55
2樓2017-06-09 09:53:54
3樓2017-06-09 09:54:27
MulanQahar
金蟲 (正式寫手)
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- 專業(yè): 細(xì)胞生長與分裂
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第一種方法，Sequencing. 第二種是，找一個(gè)離bamh 1 或 離hind3 近的digestion site. 然后用雙酶切 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
4樓2017-06-09 10:03:36
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