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周易新蟲 (初入文壇)
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[求助]
Trizol 法提取線蟲RNA 已有2人參與
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最近一直用Trizol法提取線蟲RNA，這個方法好像是從提植物的RNA改進的，提了幾十次，要么就是什么也提不出來，要么就是降解了，請教一下這是什么方面的錯誤，方法上有不對的地方嗎？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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yedansky
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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2017-06-24 23:22:12
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2017-06-24 23:22:12
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所有的玻璃試劑瓶都要高溫高壓過的，EP管要用depc水泡過，液氮研磨的菌體量不宜超過100mg，氯仿離心后吸上清不要貪多，還有75%的乙醇也要depc水來配置 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
7樓2017-06-24 08:50:30
stabilized
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2樓2017-06-23 16:10:26
原來，是這樣
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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2017-06-23 23:22:48
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2017-06-23 23:22:48
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室溫放置RNA晾干。。。這絕對會出問題啊，把EP管放到超凈工作臺里面吹一會，等到RNA快干（不能完全干，不然不好溶于DEPC水）再加DEPC水，有條件還可以加一點RNase抑制劑進去。跑膠的時候電泳相關(guān)試劑全部換新鮮的，不然很容易降解。實驗中各種操作都要在冰上進行更好。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2017-06-23 17:06:58
周易
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4樓2017-06-23 22:28:42
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