| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2399 | 回復(fù): 13 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖,點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
yedansky新蟲 (著名寫手)
|
[交流]
蛋白可溶性表達(dá) 無活性
|
||
|
有沒有可能 大腸桿菌在OD600 0.4-0.6 誘導(dǎo)時(shí),少量表達(dá)的可溶性蛋白 有很高的活性 但OD600 值在0.7-0.8或者更高,雖然為可溶性表達(dá),但是無活性,有人有這種情況么 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
金蟲 (小有名氣)
鐵桿木蟲 (著名寫手)
金蟲 (小有名氣)
|
關(guān)系應(yīng)該不大。 1. 首先蛋白可溶并不代表蛋白處于天然結(jié)構(gòu),它可以是可溶性多聚體,也可以是多種結(jié)構(gòu)的混合物,雖然沒有沉淀,但有可能活性位點(diǎn)被包埋或活性位點(diǎn)的氨基酸側(cè)鏈空間位置變化而沒有活性,這跟蛋白性質(zhì)有關(guān),所以即使可溶活性也可能很低甚至無活性。 2. 蛋白可能存在必要的修飾才有活性,原核表達(dá)系統(tǒng)無法完成,查文獻(xiàn)自行確認(rèn)。 3. 缺乏輔因子,查文獻(xiàn)自行確認(rèn)。 建議純化以后跑一下HPLC,先確認(rèn)樣品是否為單一結(jié)構(gòu)。另外,確認(rèn)一下序列里有沒有cys,如果有確認(rèn)cys是形成二硫鍵還是參與金屬離子配位的,如果沒有嘗試融合不同標(biāo)簽表達(dá)。 總之,優(yōu)先嘗試通過可溶表達(dá)獲得天然構(gòu)象的蛋白,不行嘗試復(fù)性。 |
用戶注銷 (職業(yè)作家)
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +12 | 小熊joy 2026-03-14 | 13/650 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 工科材料085601 279求調(diào)劑 +6 | 困于星晨 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +10 | 冬十三 2026-03-15 | 11/550 |
|
|
[考研] 278求調(diào)劑 +5 | 煙火先于春 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
[考研] 268求調(diào)劑 +8 | 一定有學(xué)上- 2026-03-14 | 9/450 |
|
|
[碩博家園] 湖北工業(yè)大學(xué) 生命科學(xué)與健康學(xué)院-課題組招收2026級食品/生物方向碩士 +3 | 1喜春8 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +6 | 孔志浩 2026-03-12 | 11/550 |
|
|
[考研] 0703一志愿211 285分求調(diào)劑 +5 | ly3471z 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 290分有科研經(jīng)歷,論文在投 +7 | 膩膩gk 2026-03-14 | 7/350 |
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +4 | 這么名字咋樣 2026-03-14 | 6/300 |
|
|
[考研] 297一志愿上交085600求調(diào)劑 +5 | 指尖八千里 2026-03-14 | 5/250 |
|
|
[考研] 328求調(diào)劑 +3 | 5201314Lsy! 2026-03-13 | 6/300 |
|
|
[考研] 297求調(diào)劑 +4 | 學(xué)海漂泊 2026-03-13 | 4/200 |
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +6 | Mochaaaa 2026-03-12 | 7/350 |
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +7 | 7712b 2026-03-13 | 7/350 |
|
|
[考研] 315求調(diào)劑 +9 | 小羊小羊_ 2026-03-11 | 10/500 |
|
|
[考研] 281求調(diào)劑 +9 | Koxui 2026-03-12 | 11/550 |
|
|
[考研] 土木第一志愿276求調(diào)劑,科研和技能十分豐富,求新興方向的導(dǎo)師收留 +3 | 土木小天才 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
[考研] 0817化學(xué)工程與技術(shù)考研312分調(diào)劑 +3 | T123 tt 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
[考研] 070303一志愿西北大學(xué)學(xué)碩310找調(diào)劑 +3 | d如愿上岸 2026-03-13 | 3/150 |
|