 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 7527 | 回復(fù): 10 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
yudaoqian88至尊木蟲(chóng) (知名作家)
不良人
|
[交流]
pGREEN2-0800-LUC載體是否適合農(nóng)桿菌GV3101
|
||
|
我們將pSOUP輔助質(zhì)粒轉(zhuǎn)入GV3101，長(zhǎng)斑倒是正常的，但無(wú)法在10mg/L正常濃度的四環(huán)素抗性液體培養(yǎng)基中上生長(zhǎng)，不知道是什么原因，一位做過(guò)這個(gè)實(shí)驗(yàn)的同學(xué)說(shuō)需要共轉(zhuǎn)化。今天仔細(xì)看了文獻(xiàn)，指明可以共轉(zhuǎn)，也可以分兩步轉(zhuǎn)化。但在描述合適的菌株時(shí)未說(shuō)明常用的GV3101能否使用，我們?cè)诓殚單墨I(xiàn)方法時(shí)，發(fā)現(xiàn)多數(shù)的研究者利用該載體也都是用的GV3101，特來(lái)求助。文獻(xiàn)摘取如下： 文獻(xiàn)信息如下： Plant Molecular Biology42:819–832,2000.©2000KluwerAcademicPublishers.PrintedintheNetherlands.819 pGreen: a versatile and fexible binary Ti vector for Agrobacterium-mediated plant transformation RogerP.Hellens,E.AnneEdwards,NicolaR.Leyland,SamanthaBeanandPhilipM.MullineauxJohnInnesCentre,NorwichResearchPark,Colney,Norwich,NR47UH,UK(authorforcorrespondence;e-mail:hellens@bbsrc.ac.uk;fax:C441603456844)Received8June1999;acceptedinrevisedform30January2000 Keywords: Agrobacterium ,binaryvectors, planttransformation, reportergenes, selectable markergenes, Ti vector 關(guān)于轉(zhuǎn)化部分的描述如下： The pGreen and pSoup plasmids (Figure1) can be used in a mixed electroporation. Inthisinstance, selection for co-transformed Agrobacterium can be achieved using kanamycin-containing medium only, since pGreen can not replicate in Agrobacterium without pSoup being co-resident. Alternatively, electro-competent Agrobacterium containing the pSoup can be generated, by selection for tetracycline resistance, and subsequently re-electroporated with pGreen and selection for kanamycin-resistant colonies: A.tumefaciens strains LBA4404, GV2260, GV3280, AGL-1 and EHA105 and A .rhizogenes strain LBA9402 support pGreen/pSoup replication. |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有81人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專(zhuān)業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
yudaoqian88
至尊木蟲(chóng) (知名作家)
不良人
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 67 (初中生)
- 金幣: 25673.4
- 散金: 410
- 紅花: 34
- 沙發(fā): 15
- 帖子: 7657
- 在線: 966.3小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1430329
- 注冊(cè): 2011-10-07
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 作物種質(zhì)資源與遺傳育種學(xué)
8樓2021-09-09 12:12:59
chemg
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 9.5
- 帖子: 4
- 在線: 49分鐘
- 蟲(chóng)號(hào): 6970581
- 注冊(cè): 2017-07-20
- 專(zhuān)業(yè): 蛋白質(zhì)組學(xué)
★
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
|
請(qǐng)問(wèn)psoup可以單轉(zhuǎn)大腸桿菌DH5α嗎？轉(zhuǎn)的話tet濃度是多少？ps:我們都是和pgreen共轉(zhuǎn)農(nóng)桿菌gv3101只加kana抗性，不加tet。希望能幫到你。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
2樓2017-07-20 09:09:59
yudaoqian88
至尊木蟲(chóng) (知名作家)
不良人
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 67 (初中生)
- 金幣: 25673.4
- 散金: 410
- 紅花: 34
- 沙發(fā): 15
- 帖子: 7657
- 在線: 966.3小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1430329
- 注冊(cè): 2011-10-07
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 作物種質(zhì)資源與遺傳育種學(xué)
3樓2017-07-20 10:43:00
qqhx
銅蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 17
- 帖子: 21
- 在線: 5.5小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 2185430
- 注冊(cè): 2012-12-14
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 發(fā)育生物學(xué)
4樓2018-04-23 16:59:31
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 291 求調(diào)劑 +3 | 化工2026屆畢業(yè)?/a> 2026-03-21 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 303求調(diào)劑 +5 | 安憶靈 2026-03-22 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)一志愿985，分?jǐn)?shù)349求調(diào)劑 +4 | zxts12 2026-03-21 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 資源與環(huán)境 調(diào)劑申請(qǐng)(333分) +5 | holy J 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿南大，0703化學(xué)，分?jǐn)?shù)336，求調(diào)劑 +3 | 收到VS 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料 271求調(diào)劑 +5 | 展信悅_ 2026-03-21 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | .m.. 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 南昌大學(xué)材料專(zhuān)碩311分求調(diào)劑 +6 | 77chaselx 2026-03-20 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿山大07化學(xué) 332分 四六級(jí)已過(guò) 本科山東雙非 求調(diào)劑！ +3 | 不想理你 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 二本跨考鄭大材料306英一數(shù)二 +3 | z1z2z3879 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 22408 344分 求調(diào)劑 一志愿 華電計(jì)算機(jī)技術(shù) +4 | solanXXX 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +7 | 司空. 2026-03-18 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 287求調(diào)劑 +7 | 晨昏線與星海 2026-03-19 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 中南大學(xué)化學(xué)學(xué)碩337求調(diào)劑 +3 | niko- 2026-03-19 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 261求B區(qū)調(diào)劑，科研經(jīng)歷豐富 +3 | 牛奶很忙 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | eation27 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 086500 325 求調(diào)劑 +3 | 領(lǐng)帶小熊 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 考研求調(diào)劑 +3 | 橘頌. 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[碩博家園] 湖北工業(yè)大學(xué) 生命科學(xué)與健康學(xué)院-課題組招收2026級(jí)食品/生物方向碩士 +3 | 1喜春8 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] [導(dǎo)師推薦]西南科技大學(xué)國(guó)防/材料導(dǎo)師推薦 +3 | 尖角小荷 2026-03-16 | 6/300 |
|