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YYお新蟲 (初入文壇)
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[求助]
瓊脂糖凝膠電泳 已有3人參與
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跑膠跑了50分鐘還沒跑好,是由哪些原因引起的。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
木蟲 (正式寫手)
wublab

銀蟲 (小有名氣)

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影響電泳泳動度的因素: 1、顆粒性質(zhì):顆粒的直徑、形狀及所帶靜電荷量對泳動速度有較大影響.一般來說顆粒帶凈電荷量越多,或其形狀越接近球形,在電場中的泳動速度就越快.反之則越慢. 2、電場強(qiáng)度:電場強(qiáng)度是指每一厘米的電位降.又稱為電位梯度或電勢梯度.它對泳動速度起著十分重要的作用.電場強(qiáng)度越高,帶電顆粒的泳動速度越快.反之,則越慢.根據(jù)電場強(qiáng)度(電壓的高低)大小,又可將電泳分為常壓電泳(100-500V)和高壓電泳(500-10000V).前者電場強(qiáng)度為2-10伏特/厘米,后者為70-200伏特/厘米.常壓電泳多用于分離大分子物質(zhì).高壓電泳常需要冷卻裝置.高壓電泳時間短,有時僅需數(shù)分鐘,多用于分離小分子物質(zhì). 3、溶液的性質(zhì):主要是指電極溶液(緩沖溶液)和蛋白質(zhì)樣品溶液的pH值、離子強(qiáng)度和粘度等. 4、電滲:當(dāng)支持物不是絕對惰性物質(zhì)時,常常會有一些離子基團(tuán)如羧基、磺酸基、羥基等吸附溶液中的正離子,使靠近支持物的溶液相對帶電.在電場作用下,此溶液層會向負(fù)極移動.反之,若支持物的離子基團(tuán)吸附溶液中的負(fù)離子,則溶液層會向正極移動.這種溶液層的泳動現(xiàn)象稱為電滲. 因此,當(dāng)顆粒的泳動方向與電滲方向一致時,則加快顆粒的泳動速度;當(dāng)顆粒的泳動方向與電滲方向相反時,則降低顆粒的泳動速度. 5、焦耳熱:在電泳過程中,電流強(qiáng)度與釋放出熱量(Q)之間的關(guān)系可列成如下公式: Q=I2Rt 式中R為電阻;t為電泳時間;I為電流強(qiáng)度.公式表明,電泳過程中釋放出的熱量與電流強(qiáng)度的平方成正比.當(dāng)電場強(qiáng)度或電極緩沖液中離子強(qiáng)度增高時,電流強(qiáng)度會隨著增大.這不僅降低分辨率,而且在嚴(yán)重時會燒斷濾紙或熔化瓊脂糖凝膠支持物. 6、篩孔:支持物瓊脂和聚丙烯酰胺凝膠都有大小不等的篩孔,在篩孔大的凝膠中溶質(zhì)顆粒泳動速度快.反之,則泳動速度慢. 除上述影響泳動速度的因子外,溫度和儀器裝置等因子的影響也應(yīng)考慮. |

新蟲 (初入文壇)
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