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目的蛋白將His tag包裹，蛋白不與鎳柱結(jié)合？急求純化蛋白的大神指點！ 已有2人參與
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| 如題，載體用peasy-E1，前段帶6個His標簽，因不掛柱，又在后端加6個His標簽，測序正確，能夠表達且跑蛋白膠表達量很高，酶活也有，就是過鎳住時，結(jié)合不上去，目標蛋白在流穿的bunding buffer 中，分析是：His tag被包裹在目的蛋白里，如何解決這個問題？？？得不到高純度的蛋白，實驗被迫中止，急求過鎳柱的高手指點�。�！ |
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原核表達很多蛋白都會過量表達。蛋白短時間內(nèi)大量表達而來不及正確折疊，你先把你現(xiàn)有的表達時間縮小一倍看看。如果還不能解決，你只能想辦法把把結(jié)構(gòu)打開，再重新折疊。對了，你的蛋白不掛柱，但能溶解嗎？有沒有沉淀啥的？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
8樓2017-08-07 08:01:37
水吟秀
鐵蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
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- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學
2樓2017-08-06 16:52:43
3樓2017-08-06 22:40:46
4樓2017-08-06 23:00:22
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