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[交流]
酵母轉(zhuǎn)化
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做了一兩個月了，酵母轉(zhuǎn)化一直不成功，請做過相關(guān)實(shí)驗(yàn)的小伙伴給點(diǎn)建議�。�！ 我的載體是pPICZaA，酵母菌株是GS115，用SacI酶切質(zhì)粒線性化，用的10x 的體系（質(zhì)粒共10ug），酶切后純化得到質(zhì)粒，再轉(zhuǎn)化到GS115中，可是問題是酶切后的質(zhì)粒濃度很低，還不到100ng/ul，轉(zhuǎn)化要求加入5-10ug 質(zhì)粒！哪位朋友可以給點(diǎn)意見，非常感謝 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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Romanticman
新蟲 (正式寫手)
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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2017-05-07 22:23:01
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2017-05-07 22:23:01
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這個沒有做過，我們有做酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)，過程和你的相似，陽性鑒定時如果有陽性，測序又不正確，很有可能是假陽性，建議陽性鑒定采用混合引物 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
曾小旭9樓2017-04-18 00:33:26
2樓2017-04-16 23:34:02
choujiaoqi
鐵桿木蟲 (知名作家)
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2017-05-07 22:23:01
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2017-05-07 22:23:01
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可以考慮換個菌種，有的菌種跟轉(zhuǎn)進(jìn)去的質(zhì)粒不兼容，導(dǎo)致一個細(xì)胞內(nèi)質(zhì)�？截悢�(shù)少。還有是不是質(zhì)粒太大，轉(zhuǎn)進(jìn)去難度大 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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3樓2017-04-17 00:20:50
張凡云
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4樓2017-04-17 07:27:43
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