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目的蛋白將His tag包裹,蛋白不與鎳柱結(jié)合?急求純化蛋白的大神指點! 已有2人參與
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| 如題,載體用peasy-E1,前段帶6個His標簽,因不掛柱,又在后端加6個His標簽,測序正確,能夠表達且跑蛋白膠表達量很高,酶活也有,就是過鎳住時,結(jié)合不上去,目標蛋白在流穿的bunding buffer 中,分析是:His tag被包裹在目的蛋白里,如何解決這個問題???得不到高純度的蛋白,實驗被迫中止,急求過鎳柱的高手指點。! |
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不好意思,上面說的把蛋白當成原核的來處理了。如果是原核表達,你可以參照一下,如果不是你就變性一下,再復(fù)性。實在不行你就重新構(gòu)建到一個新載體中試試。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
鐵蟲 (初入文壇)
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