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cifer1230金蟲 (著名寫手)
cifer1230
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[交流]
誰來幫我分析哈，這啥情況？
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下圖是我剛泡的pcr。從左往右標(biāo)號1，2，3，4，5，6，7，8.其中1，2是同一個(gè)基因；3，5是相同的基因；4，是marker2000；6，8同一個(gè)基因；7 一：1,2是同一個(gè)基因，奇怪的是出現(xiàn)的帶，要比我要目的基因（144bp）的大，這條帶是300+了吧，這個(gè)情況，我應(yīng)該怎么調(diào)整。 二：關(guān)于3和5，他們應(yīng)該在110處，這是什么情況，還需要調(diào)整退火溫度，應(yīng)該往上跳是嗎？還是引物有問題？ 三：7，有二聚體，我是不是應(yīng)該延長退火溫度？或者在升高退火溫度？ 就我這些問題，請大家于百忙中幫忙分析下，感謝！ 膠一 3.png |
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9樓2017-10-19 08:59:29
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3樓2017-10-17 11:51:08
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7樓2017-10-18 17:36:00
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1.2的片段大小的問題。調(diào)什么都沒用，應(yīng)該引物擴(kuò)出來就是那么大的。主條帶卻沒出來。3，5提高退貨溫度試試，可以將現(xiàn)在的pcr產(chǎn)物稀釋之后做模板，用你的引物闊一下看看是不是單一110的片段。是不是很亮，七有引物二聚體正常，主條帶對就行了。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
8樓2017-10-18 21:24:47
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