各位蟲蟲好：
       大家好，我現(xiàn)在在做一個環(huán)肽的純化，出了問題，我把問題說一下，大家?guī)臀曳治鲆幌履某鰡栴}了。
       我的實驗過程是這樣的：DEAE sepharose FF樹脂處理，水洗掉乙醇，用1mol氫氧化鈉活化半小時，水洗至中性，然后用上樣緩沖液（10mmol，pH7.6的磷酸鹽）浸泡脫氣（為了使樹脂pH盡快平衡至7.6）1h，然后裝柱，再用上樣緩沖液平衡至柱床體積恒定。然后用1molNaCl/10nmol，pH7.6的磷酸鹽再生柱子，然后再用上樣緩沖液洗5個柱體積。上樣，樣品是經(jīng)過凍干后溶在上樣緩沖液里的。然后用0.05molNaCl/10mmol，pH7.6洗脫未掛柱的雜質(zhì)，然后用另外一個高鹽濃度洗脫目的物。去年7-10月份做出來效果非常好，重現(xiàn)性也非常好，幾乎每次做出來結(jié)果都一樣，在0.05和上樣緩沖液洗脫主要雜質(zhì)，高鹽時洗脫目的物，而且沒有主要雜質(zhì)。
      然后我11月份停了一個月后，12月份再做就出現(xiàn)情況了。同樣的條件，同樣的試劑，同樣的樣品，目的物不掛柱了，在低鹽甚至在無鹽時和雜質(zhì)一起洗脫下來。今年3月份到現(xiàn)在，目的物還是沒掛住，一直不能重現(xiàn)出來。我想中間只有變化的是天氣，沒其他情況了。
       大家?guī)臀曳治鱿�，是什么原因。還有溫度對離子交換影響真的這么大嗎？還有個問題，我把1mol氯化鈉溶解在1L緩沖液里，pH怎么會低了1.0個pH。謝謝！ 返回小木蟲查看更多