欲用熒光法(FRET)研究BSA與豆豉纖溶酶的相互作用,求合適的方案(20金幣)
本人欲研究BSA和豆豉纖溶酶的相互作用,主要是想求得兩者在tris-HCL緩沖溶液中的結(jié)合常數(shù)、結(jié)合位點(diǎn)、作用距離等,不行的話求得結(jié)合常數(shù)也可以
開始欲用熒光猝滅法,但猝滅法多用于BSA與小分子作用,蛋白質(zhì)之間的作用不太適用,而且最主要的原因是兩者都含有色氨酸,激發(fā)時(shí)都有熒光而形成干擾。
部分文獻(xiàn)報(bào)道可用熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)測(cè)得兩蛋白質(zhì)間的作用距離,可選用的外源性熒光是熒光蛋白,有機(jī)染料,鑭系染料。選用熒光蛋白的話還要用到質(zhì)粒重裝,細(xì)胞轉(zhuǎn)染等分子生物學(xué)手段,本人是做藥學(xué)的,對(duì)分子生物學(xué)這些技術(shù)不懂,老板也不可能允許這么做。那就剩下選用有機(jī)染料或是鑭系染料了,這兩者中有沒(méi)有適合用于研究蛋白質(zhì)相互作用的呢?
或者有沒(méi)有其他適合的其他方法?
希望能說(shuō)的具體一些,你看我也寫了一大版!
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友情幫頂吧,不過(guò)如果有這個(gè)方案,人家愿不愿意給您啊?
就算是純學(xué)術(shù)交流吧,應(yīng)該沒(méi)有什么損失吧
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純屬學(xué)術(shù)交流哈