制備液相峰形問題
小蟲分離的物質(zhì)在HPLC上顯示的峰形很好,但在制備液相(島津的制備液相,YMC 250*10的柱子,流速4ML/MIN)上會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重的拖尾現(xiàn)象,有的時(shí)候會(huì)變成兩個(gè)峰!但再次經(jīng)HPLC檢測后發(fā)現(xiàn)這兩個(gè)峰是同一種物質(zhì)!我分離的是酸性物質(zhì),流動(dòng)相的水相中加了0.5%的醋酸,用雙泵走的!
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小蟲分離的物質(zhì)在HPLC上顯示的峰形很好,但在制備液相(島津的制備液相,YMC 250*10的柱子,流速4ML/MIN)上會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重的拖尾現(xiàn)象,有的時(shí)候會(huì)變成兩個(gè)峰!但再次經(jīng)HPLC檢測后發(fā)現(xiàn)這兩個(gè)峰是同一種物質(zhì)!我分離的是酸性物質(zhì),流動(dòng)相的水相中加了0.5%的醋酸,用雙泵走的!
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我想應(yīng)該是進(jìn)樣量大了些吧
將流動(dòng)相極性改大點(diǎn)
拖尾的問題原因很多,首先您先看看是不是你分離時(shí)的參數(shù)設(shè)置,可以適當(dāng)調(diào)整一下參數(shù),如果不是這個(gè)問題就是儀器上出現(xiàn)的問題,是不是柱子的問題,還是有漏液的情況,好好檢查一下儀器,
您用的是10mm,柱子,峰型不好的話,是不是柱子塌陷有點(diǎn)嚴(yán)重啊。