第一，沉淀的問題。最好在灌流實(shí)驗(yàn)前就測定樣品在灌流液中的穩(wěn)定性，溶解性，可以采用 k-r solution或者 k-r solution灌流流出液進(jìn)行穩(wěn)定性考察。看看樣品是否存在明顯的降解或者沉淀。
第二，吸附的問題。藥物溶液流經(jīng)蠕動(dòng)泵管路（不接動(dòng)物腸段），對比濃度變化，如果吸附很厲害，就先吸附飽和再進(jìn)行灌流實(shí)驗(yàn)。
第三，灌流腸段的問題。最多可以選三個(gè)腸段進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，但腸段一定不要太長，長了未必吸收量就大，越長影響因素越多。最好能夠固定流出流入管，保證其在灌流過程中不被碰到，從而確保單位時(shí)間流出液體積的相對恒定，否則計(jì)算會很頭疼的。
第四，出血什么的問題。結(jié)扎管子的時(shí)候盡可能小心，避開大血管的位置，而且注意大鼠的麻醉，一般不動(dòng)的話不會怎么出血的。

最后祝實(shí)驗(yàn)順利。

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9樓: Originally posted by jonathonswq at 2012-06-30 13:23:55
第一，沉淀的問題。最好在灌流實(shí)驗(yàn)前就測定樣品在灌流液中的穩(wěn)定性，溶解性，可以采用 k-r solution或者 k-r solution灌流流出液進(jìn)行穩(wěn)定性考察�？纯礃悠肥欠翊嬖诿黠@的降解或者沉淀。
第二，吸附的問題。藥物溶液 ...

再請教一下1.沉淀是灌流液中的鈣產(chǎn)生了沉淀,剛配好的時(shí)候調(diào)節(jié)pH是澄清的,但是37度水浴后就有沉淀產(chǎn)生了,這個(gè)情況怎么處理?
2.吸收速率常數(shù)大學(xué)有什么等級劃分么,就想Papp一樣,大于什么等級屬于容易吸收小于什么等級屬于難吸收?謝謝了

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10樓: Originally posted by guo2010 at 2012-06-30 17:05:18
再請教一下1.沉淀是灌流液中的鈣產(chǎn)生了沉淀,剛配好的時(shí)候調(diào)節(jié)pH是澄清的,但是37度水浴后就有沉淀產(chǎn)生了,這個(gè)情況怎么處理?
2.吸收速率常數(shù)大學(xué)有什么等級劃分么,就想Papp一樣,大于什么等級屬于容易吸收小于什么等 ...

灌流液那個(gè)，以前我們是買的粉直接配溶液就行，沒看到沉淀的情況。建議買粉或者自己重新配。還有就是可能腸道內(nèi)容物導(dǎo)致沉淀出現(xiàn)的，如果是這樣就多沖一會，后面的再上含藥的灌流液。
吸收速率分級這個(gè)，不太記得了，你找?guī)灼�好點(diǎn)文獻(xiàn)看看應(yīng)該都有寫的。這個(gè)幫不了你了。

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11樓: Originally posted by jonathonswq at 2012-07-01 18:51:27
灌流液那個(gè)，以前我們是買的粉直接配溶液就行，沒看到沉淀的情況。建議買粉或者自己重新配。還有就是可能腸道內(nèi)容物導(dǎo)致沉淀出現(xiàn)的，如果是這樣就多沖一會，后面的再上含藥的灌流液。
吸收速率分級這個(gè)，不太記得 ...

你試驗(yàn)的過程中有沒有出現(xiàn)流出液藥物濃度大于灌流液的現(xiàn)象?我有兩個(gè)間隔75分鐘的時(shí)間點(diǎn)出現(xiàn)流出液濃度大于灌流液的現(xiàn)象,我結(jié)扎膽管了,可能的原因回事什么呢?還有你有沒有做過體外實(shí)驗(yàn)用過腸原代細(xì)胞么?
謝謝啦!

灌流液濃度高可能是因?yàn)榱鞒鲶w積太小了，這就是我前面提到的，你要保證流出液體體積的相對穩(wěn)定，最好每個(gè)時(shí)間段都差不多。這點(diǎn)很重要。最好在實(shí)驗(yàn)過程中做好大鼠腹腔的補(bǔ)液，否則可能會出現(xiàn)上述問題。
我以前做過caco-2細(xì)胞，但這種細(xì)胞是結(jié)腸腺癌細(xì)胞非原代細(xì)胞，原代細(xì)胞的培養(yǎng)真心不熟。

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13樓: Originally posted by jonathonswq at 2012-07-02 10:26:39
灌流液濃度高可能是因?yàn)榱鞒鲶w積太小了，這就是我前面提到的，你要保證流出液體體積的相對穩(wěn)定，最好每個(gè)時(shí)間段都差不多。這點(diǎn)很重要。最好在實(shí)驗(yàn)過程中做好大鼠腹腔的補(bǔ)液，否則可能會出現(xiàn)上述問題。
我以前做過c ...

腸腔液的補(bǔ)充是要在腹腔滴生理鹽水么?我做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候是把腸段結(jié)扎了之后又放回腹腔然后蓋了紗布,紗布上滴37度生理鹽水的,是不僅要做紗布上滴生理鹽水還要在腹腔滴么?
Peff的計(jì)算是一只大鼠灌流的120分鐘求一個(gè)平均值然后算作一個(gè)數(shù)據(jù)么?
流出液濃度增大的確可能是你說的原因,我在換西林瓶是動(dòng)了插管~~~~(>_<)~~~~
謝謝啦!

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14樓: Originally posted by guo2010 at 2012-07-02 17:02:50
腸腔液的補(bǔ)充是要在腹腔滴生理鹽水么?我做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候是把腸段結(jié)扎了之后又放回腹腔然后蓋了紗布,紗布上滴37度生理鹽水的,是不僅要做紗布上滴生理鹽水還要在腹腔滴么?
Peff的計(jì)算是一只大鼠灌流的120分鐘求一個(gè)平均 ...

按理說用吸滿生理鹽水的紗布就可以了，不需要再往腹腔滴加的。不過如果是麻醉效果不好的話，或者持續(xù)時(shí)間不夠的話可以往腹腔滴幾點(diǎn)麻醉劑。
計(jì)算Peff的時(shí)候，可以計(jì)算每個(gè)時(shí)間間隔的通透值，然后再平均。有些實(shí)驗(yàn)中可能存在飽和什么的，藥物減少的速度會越來越慢的，所以120分鐘內(nèi)平均是不對的，要是這樣的話，索性直接取120分鐘那個(gè)點(diǎn)好了。
關(guān)于Peff的計(jì)算這一塊，好多涉及到腸灌流的學(xué)位論文有詳細(xì)的表述，建議你多看看學(xué)位論文方面的資料
，

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15樓: Originally posted by jonathonswq at 2012-07-03 12:24:38
按理說用吸滿生理鹽水的紗布就可以了，不需要再往腹腔滴加的。不過如果是麻醉效果不好的話，或者持續(xù)時(shí)間不夠的話可以往腹腔滴幾點(diǎn)麻醉劑。
計(jì)算Peff的時(shí)候，可以計(jì)算每個(gè)時(shí)間間隔的通透值，然后再平均。有些實(shí)驗(yàn) ...

好的,謝謝啦,有問題在向你請教O(∩_∩)O~