納米金與巰基DNA的修飾相關(guān)問題
由于小生剛剛接手這個(gè)課題，心中頓感茫然�？催^一些帖子和文獻(xiàn)，卻思維尤覺混亂。在此希望哪位帥哥大俠幫我解開困惑，給予詳談，撥開實(shí)驗(yàn)失敗之陰霾，重見精準(zhǔn)數(shù)據(jù)之美好。小生必定感激不盡。
該好好說話了~
問題一：關(guān)于整個(gè)流程應(yīng)該怎樣的一個(gè)步驟和流程。之前的帖子我也看了一些，總是覺得凌亂，東一句，西一句的。而且方法不一。我想知道，巰基的DNA是否應(yīng)在與納米金結(jié)合之前先進(jìn)行活化，那么活化步驟是什么，用什么試劑以及，摩爾比。還有記下來是不是就可以直接與納米金放在一起里用搖床培育16個(gè)小時(shí)呢？再接下來是不是還要用NaCl的老化，我又不清楚了。老化是怎么回事，他的濃度時(shí)多少。
問題二：最簡單表征DNA與納米金是否接上手段是什么呢？
問題三：只是知道Mirkin的很多文章關(guān)于這個(gè)試驗(yàn)很是權(quán)威，但是我只是知道他的名字，文章剛才看了下，比較多。能不能推薦幾篇給我，直接一針見血的文獻(xiàn)。直接發(fā)文章標(biāo)題或者鏈接就可以，我自己下載就O了。
問題雖然較多，但是希望各位大牛理解我此時(shí)舉目無門的心境。先謝謝大家~
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遇到做一樣?xùn)|西的人了 我也要來做這方面的 資料不好找呀
For the preparation of DNA-Au NPs, the terminal disulfide groups of the DNA strands were reduced by soaking the strands in a 0.1 M dithiothreitol phosphate buffer solution (0.17 M phosphate, pH 8.0) for 30 min. The cleaved DNA strands were purified on a NAP-5 column (GE Healthcare) and added to the gold colloid (the final oligonucleotide concentration is ~ 3 μM). The solution was buffered to 0.15 M NaCl, 10 mM phosphate, and 0.01 % SDS by simultaneously adding appropriate amount of 1 % SDS solution, 2 M NaCl solution and 0.1 M phosphate buffer solution (pH 7.4). After incubation overnight at room temperature with gentle shaking, the Au NP solution was centrifuged and
redispersed in 0.1 M NaNO3, 0.005 % Tween 20, 10 mM MOPS buffer (detection buffer, pH 7.5) after the supernatant was removed.
以上是我找到的mirkin 實(shí)驗(yàn)組 做DNA與納米金顆粒連接的literature procedure。希望對你有幫助，
你好，這篇文獻(xiàn)的鏈接可以給我一下嗎？謝謝你的解答，前幾天一直沒怎么上網(wǎng)。
A DNA-Gold Nanoparticle Based Colorimetric Competition Assay
for the Detection of Cysteine 的supporting informations
呵呵，謝謝啦~回復(fù)的有點(diǎn)晚，別介意呀。剛接觸這個(gè)課題，有點(diǎn)蒙，又沒有師兄師姐帶，所以有一時(shí)找不到頭緒。你也是做個(gè)方向的嗎？