1.首先說明你的這個方法中 咖啡因標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置有問題，應(yīng)該用水溶解caffeine，這樣進(jìn)樣時就不會出現(xiàn)峰拖尾了或峰形不好了。
2.你這個測試線性的方法設(shè)計(jì)有問題。你用一個濃度溶液分別進(jìn)10ul、20ul、50ul、100ul。你這考察的是進(jìn)樣器的進(jìn)樣體積的線性。實(shí)際在我們的儀器驗(yàn)證中更看重的是響應(yīng)的線性。也就是說你應(yīng)該配置一系列不同濃度的caffeine的水溶液。如：0.5ug/ml、1.0ug/ml、50ug/ml、250ug/ml、500ug/ml，然后進(jìn)同樣體積（如10ul或20ul）的溶液。出圖后，做響應(yīng)與濃度的線性，這是我們通常說的線性。

對不起，我寫錯了。這五個溶液的濃度是：0.5ug/ml、1.0ug/ml、5.0ug/ml、25ug/ml、50ug/ml。

嘗試用流動相稀釋樣品試試。另外線性需要配制不同濃度溶液，最好不要通過進(jìn)樣量變化來做線性

做法2樓講的很清楚，色譜現(xiàn)象可以理解為：體積超載

體積梯度的比例不塌理想，嘗試其他的配比。