生物材料在做電鏡時(shí)的固定方法
各位大神，小女子最近要做自己合成的抗菌材料的電鏡實(shí)驗(yàn)。
我的材料是直接用粉末壓成片，然后拿去養(yǎng)菌，現(xiàn)在要看菌在材料表面的形態(tài)，但由于材料在任何溶劑中都會(huì)崩解散開，因而想求助各位大神有木有一種固定方法是可以不用溶劑的？
[ Last edited by doukirdou on 2014-12-23 at 19:52 ]
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京公網(wǎng)安備 11010802022153號(hào)
你的材料溶解于乙醇？不能逐步脫水？
但我猜想你的材料在水中是不溶解的吧
那你可以把你養(yǎng)菌后的材料用PBS 洗干凈，然后再戊二醛里面固定細(xì)菌，晾干至完全沒有水分，就可以做電鏡了
呵呵，用粉末壓片就是麻煩一些
你可以試試直接用多聚甲醛熏蒸的方法，印象中曾經(jīng)看過類似的文章，好像就是中文的
不是啊，是在溶液中會(huì)崩解散開
，
那你的粉末壓片在養(yǎng)菌溶液里也崩解散開了嗎？
是用的固體培養(yǎng)基和霉菌。
固體培養(yǎng)基可以長(zhǎng)細(xì)菌的嗎？那你要怎么去除樣品表面飛固定的細(xì)菌 在做電鏡呢
1、先離心
2、用戊二醛2.5%的戊二醛在4度冰箱固定1.5個(gè)小時(shí)
3、用pH6.8的PBS沖洗三次，每次10分鐘
4、用50%，70%，80%，90%乙醇梯度脫水，每次10-15分鐘
5、用100%的乙醇脫水三次，每次10-15分鐘
6、100%乙醇：乙酸異戊酯=1：1和純乙酸異戊酯置換，每次15分鐘
7、置換后的樣品放入濾紙上，在干燥器中保持8小時(shí)以上