沒有芳香環(huán)吸收的多肽如何確定濃度
合成了個(gè)多肽,用hplc純化完了,質(zhì)譜測分子量也對(duì)
但不知道純化完了產(chǎn)率多少
這才想起來多肽里沒有Phe, Tyr, Trp之類的帶芳香環(huán)的氨基酸, 260或280左右沒有吸收沒法算濃度啊
因?yàn)樽隽藗�(gè)很昂貴的反應(yīng), 大概只投了6 mg的原料~~~而且hplc純化完了估計(jì)里面還有些鹽,所以把溶劑除去后稱質(zhì)量肯定沒希望
HPLC純化的時(shí)候是測的215nm,肽鍵的吸收,可是能吸收這波長的官能團(tuán)也太多了, 我這里面還有什么Arg和triazole之類的基團(tuán),沒法計(jì)算啊
慘了,本來這合成里面就用到些老貴的東西了,結(jié)果做出來不知道里面濃度多少?zèng)]法應(yīng)用
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京公網(wǎng)安備 11010802022153號(hào)
跑tricine sds-page，有個(gè)幾微克就夠了。積出marker的條帶深淺和樣品的條帶深淺，然后計(jì)算濃度。
雖然不非常準(zhǔn)，但是基本也差不了多少。
我這多肽一共就8-10個(gè)氨基酸,分子量1.5kDa, 上膠估計(jì)就直接跑沒了
梯度洗脫或許效果會(huì)好一些
所以要跑tricine sds-page啊，普通的膠不行的。
給你發(fā)了個(gè)圖，網(wǎng)上下的，1kda都能跑出來。
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