抗體可以用于WB,但不能用于免疫熒光
我有個抗體用Western Blot跑的效果非常好,但是一用于免疫熒光就出現(xiàn)詭異現(xiàn)象
免疫熒光的結(jié)果和其他人文獻報道以及我之前實驗結(jié)果完全矛盾,總之就是蛋白聚集在了本來不應(yīng)該聚集的地方
我老板看到結(jié)果很興奮 覺得是重大發(fā)現(xiàn),她不相信我,堅持不可能是實驗錯誤。 又非常摳門,不愿意再買一管其他的抗體試下
免疫熒光用的二抗也肯定沒問題,因為以前用這個二抗做過別的蛋白的免疫熒光
有什么理論支持能幫我說明用于WB的抗體不一定能用于細胞免疫熒光啊
我看那個公司的網(wǎng)站上賣兩種這個蛋白的抗體,一種抗體寫明了可以用于免疫熒光,另一種沒有標(biāo)上可用于免疫熒光,所以懷疑是抗體有問題
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京公網(wǎng)安備 11010802022153號
本來很多抗體就不同時適用于Western和免疫熒光。不過如果免疫熒光的抗體真的標(biāo)記到抗原上,又和預(yù)期定位不一樣,的確很可能比和預(yù)期定位一致的結(jié)果更有價值,
公司沒說可用于免疫熒光的抗體不適用于免疫熒光的幾率比較大。
不明白你老板覺得可能是驚喜的結(jié)果,怎么又不允許你驗證呢?
補個knock down實驗
在生物圈里,很多重大發(fā)現(xiàn)就來自實驗誤差
說明書上應(yīng)該清楚地寫了它的使用范圍,沒有驗證,驚喜從何而來呢?
很多抗體公司的產(chǎn)品都會附帶抗體說明書,上面有的就說明可以做,沒有的就是不適合做的。