需要做一段120-150bp的雙鏈DNA
需要做一段120-150bp的雙鏈DNA，沒有模板可以用
公司說最多只能合成60nt的單鏈，怎么設(shè)計(jì)PCR反應(yīng)把這個(gè)雙鏈擴(kuò)出來呢？引物用多少?zèng)]關(guān)系，步驟不要太多
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京公網(wǎng)安備 11010802022153號(hào)
這個(gè)直接全基因合成就行啊，我們可以的
我老板是鐵公雞啊~~~伊肯定不會(huì)讓我去找公司做合成的
最簡(jiǎn)單的方法當(dāng)然是隨便找個(gè)雙鏈的片段，然后一點(diǎn)點(diǎn)接引物往外延長(zhǎng)出去~
最后再把延長(zhǎng)出來的片段單獨(dú)擴(kuò)出來，只是覺得太麻煩了
大片段連接也做過，只是這片段實(shí)在是不大不?br>，
三條60bp的單鏈，1和3是正鏈，2是反鏈，注意需要overlap，1和2退火，再1+2和3退火，可以得到類似雙鏈的模板產(chǎn)物，用此產(chǎn)物作模板，注意不要做膠收回。
再用一對(duì)引物，PCR，應(yīng)該是可以達(dá)到目的的。
嗯，樓上的方法很好啊，可以試試