各位姐姐哥哥們好！

最近做一個蛋白的磷酸化檢測遇到了問題，懇請各位有經(jīng)驗的姐姐哥哥指教。我的磷酸化抗體是找國外的一個實驗室要的，他們自己做的抗體，用著挺好，條帶250kDa左右，我用梯度膠跑的，有時候條帶在350kDa左右，拖尾很嚴重但挺亮，而且很靠上感覺像是在膠孔的位置；有時候有一條很弱的帶，也在350kDa左右，不拖尾。用了knockout細胞核總蛋白的抗體均表明抗出來的帶是目的蛋白。為什么有時候拖尾有時候條帶弱啊？

更讓人郁悶的是復孔間差異挺大，開始覺得是自己操作問題，可是做了很多次，已經(jīng)很注意了，復孔之間還是不齊，感覺不像是我操作的問題。有沒有人遇到這種情況，求指教啊，這個western做了三個月了，課題卡這兒走不動了，著急傷心啊。。。。。 返回小木蟲查看更多