煙草基因組提取呈現(xiàn)膠凍狀難溶物
根據(jù)經(jīng)典CTAB法提取煙草葉片基因組DNA,加入異丙醇后出現(xiàn)白色絮狀沉淀,用70%乙醇洗滌后吹干,用水或者TE溶解,均難以溶解,呈現(xiàn)膠凍狀物質(zhì),也無法再次用裂解液溶解,該怎么解決?尋求幫助
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根據(jù)經(jīng)典CTAB法提取煙草葉片基因組DNA,加入異丙醇后出現(xiàn)白色絮狀沉淀,用70%乙醇洗滌后吹干,用水或者TE溶解,均難以溶解,呈現(xiàn)膠凍狀物質(zhì),也無法再次用裂解液溶解,該怎么解決?尋求幫助
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京公網(wǎng)安備 11010802022153號
建議提取DNA的樣品不宜過多,用氯仿異戊醇抽提時不要吸到有機(jī)相,可以少吸一點(diǎn)上清,異丙醇用等體積低溫沉降DNA,再試試。
試過了,還是沒有辦法解決這個問題,不過仍然感謝您
樣品量不要太多,氯仿異戊醇抽提兩次,溶解的時候稍微加多一點(diǎn)水或TE,37度溫浴溶解。
我用了TE過夜溶解都沒能溶解掉它們,真是頑固啊它們
重新用氯仿異戊醇抽提一遍試試,就是從加氯仿異戊醇開始把下面的步驟再進(jìn)行一遍。最后TE多加點(diǎn),50微升起。
另外,會不會是你磨樣的時候,吸取上清的時候操作有問題,問問同實(shí)驗(yàn)室的其他人。
實(shí)驗(yàn)室就我自己做這個煙草,我也感覺我操作有問題,因?yàn)閯e人都是用這個方法沒遇到我這樣的問題,用其他方法還是這樣的現(xiàn)象,但我不知道該怎么排除我操作哪一步出了問題,麻煩您幫我分析一下,哪一步操作最有可能出現(xiàn)問題,我實(shí)在分析不出來了
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提取的基因組DNA不但用水或者TE無法溶解,就是放到裂解液里想要重新抽提,都溶解不了,這頑固分子究竟是什么?