經(jīng)常做自殺質(zhì)粒敲除的大佬來給點(diǎn)建議吧........
最近在做黃單胞菌的基因敲除,用的pk18的自殺質(zhì)粒,通過三親接合的方法導(dǎo)入黃單胞菌,做了一個(gè)月了,連單交換子都沒拿到........,構(gòu)建好的自殺質(zhì)粒是驗(yàn)證過的,完全正確。
有做過這個(gè)實(shí)驗(yàn)的嗎?交流一下經(jīng)驗(yàn)吧..
順便說一下,我做的是稻黃單胞菌,實(shí)驗(yàn)室以前的人就說這個(gè)菌不太好做敲除。同組的其它人做野油菜黃單胞菌的敲除就特別容易操作。引起這個(gè)差別的原因是什么呀.............
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我公司經(jīng)常用結(jié)合方法做細(xì)菌敲除
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三親很難做,電轉(zhuǎn)吧,是西大生科院六樓的同學(xué)吧
我們是電轉(zhuǎn)做敲除