求助:用鼠雜交瘤方法制備鼠單抗,總是得到亞型為IgM的單抗,何解?
如題,最近經(jīng)手的兩個項目,用BalB/C小鼠免疫后摘取脾臟,與SP2/0細(xì)胞融合(PEG法),篩選獲得的單克隆細(xì)胞株,上清用thermo的kit(cat#88-50630)測亞型,兩個項目拿到的抗體居然大多數(shù)都是IgM的,這是為啥呀?苦惱。gyesang@hc-material
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如題,最近經(jīng)手的兩個項目,用BalB/C小鼠免疫后摘取脾臟,與SP2/0細(xì)胞融合(PEG法),篩選獲得的單克隆細(xì)胞株,上清用thermo的kit(cat#88-50630)測亞型,兩個項目拿到的抗體居然大多數(shù)都是IgM的,這是為啥呀?苦惱。gyesang@hc-material
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其實(shí)也無所謂啦,知道可變區(qū)序列后,構(gòu)建載體變?yōu)镮gG唄。然后細(xì)胞表達(dá)IgG。
是不是免疫得不夠?最早產(chǎn)生的免疫球蛋白是IgM,后面才會產(chǎn)生IgG。一般3次免疫后在取脾臟之前還得靜脈注射加強(qiáng)免疫一針。
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