無痕敲除抗生素失效
最近在用自殺質(zhì)粒pk18mobsacb敲除紅球菌的基因，在敲除一個(gè)目的基因后，再敲下一個(gè)基因的時(shí)候電轉(zhuǎn)質(zhì)粒后用卡娜霉素篩選的時(shí)候平板長(zhǎng)出了大量菌落，挑取了一些菌落均為沒有進(jìn)行一輪同源交換的菌，而對(duì)照組沒有轉(zhuǎn)質(zhì)粒的平板卻沒有菌生長(zhǎng)，苦思冥想不知道什么原因，有哪位前輩曾經(jīng)遇到過這種問題嗎，請(qǐng)指教一下
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京公網(wǎng)安備 11010802022153號(hào)
紅球菌有專門的敲除質(zhì)粒系統(tǒng)吧
這個(gè)質(zhì)粒是可以的
，
我公司一般用Sacb系列的質(zhì)粒，敲除陰性菌
這個(gè)質(zhì)粒是經(jīng)過兩輪同源重組敲基因的啊，在卡那上能長(zhǎng)，應(yīng)該是經(jīng)過一輪重組，你還得用15%蔗糖篩兩輪重組后的陽(yáng)性克隆啊