HEK293細(xì)胞形態(tài)
各位前輩,初嘗細(xì)胞培養(yǎng),養(yǎng)的是HEK293T細(xì)胞,復(fù)蘇時(shí)細(xì)胞分散的挺好,貼壁也挺好的,但是兩天后觀察細(xì)胞表面有很多黑點(diǎn),成簇生長(zhǎng)的細(xì)胞看不清形態(tài),很臟的樣子,詳見圖片,請(qǐng)問(wèn)是支原體污染了嗎?

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各位前輩,初嘗細(xì)胞培養(yǎng),養(yǎng)的是HEK293T細(xì)胞,復(fù)蘇時(shí)細(xì)胞分散的挺好,貼壁也挺好的,但是兩天后觀察細(xì)胞表面有很多黑點(diǎn),成簇生長(zhǎng)的細(xì)胞看不清形態(tài),很臟的樣子,詳見圖片,請(qǐng)問(wèn)是支原體污染了嗎?

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京公網(wǎng)安備 11010802022153號(hào)
支原體污染顯微鏡下看不出來(lái),可以測(cè)一下
hek 293細(xì)胞貼壁型(半貼壁),生長(zhǎng)較快,常用于病毒包裝使用
你的提問(wèn),可以做以下考慮:
1. 細(xì)胞代次較高,培養(yǎng)狀態(tài)不佳
2. 細(xì)胞老化:對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期活力旺盛細(xì)胞較少,死細(xì)胞碎片黏附
3. 支原體污染:PCR,設(shè)計(jì)支原體引物,兩輪PCR檢測(cè)即可(設(shè)計(jì)陽(yáng)性對(duì)照組、陰性對(duì)照組、目的組、空白組,四個(gè)組),
樓主的情況,解決方案是:1,重新購(gòu)買株系,因?yàn)槟氵@個(gè)明顯使用雙抗是解決不了的;2,非要處理的話,得需要清除細(xì)菌或支原體的試劑。我不是商家,有一款試劑很好用,我之前就遇到了你說(shuō)的情況。迪,醫(yī),明,自己去搜索吧
可以到ATCC官網(wǎng)上查一下細(xì)胞正常形態(tài),和自己的對(duì)比一下看看是不是正常。