現(xiàn)在,我想要通過對(duì)人體的尿液進(jìn)行HPLC分析?
現(xiàn)在,我想要通過對(duì)人體的尿液進(jìn)行HPLC分析,來尋找某一種疾病是否在正常人和病人兩個(gè)群體間具有差異性,類似于尋找標(biāo)志物來建立一個(gè)檢測(cè)方法。
但是人體尿液中的代謝物成分很復(fù)雜 而我們的目的只是想對(duì)尿液的成分進(jìn)行一個(gè)完全的分析,通過HPLC能達(dá)到這樣的目的么? 我詢問過一些老師,他們說HPLC達(dá)不到這樣的要求 需要對(duì)樣品進(jìn)行前處理和分離萃取,有目的性地分析里面的某一類成分,請(qǐng)問大家有什么好的方法或者建議,抑或是想法,能達(dá)到尿液里面成分的全面分析?我有一個(gè)想法,不知道是否可行,對(duì)尿液進(jìn)行前處理除去蛋白質(zhì) 然后通過制備柱進(jìn)行初步的分離,取不同時(shí)間段的收集液進(jìn)行HPLC分析,這樣可行么?
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尿液組成非常復(fù)雜,最好找到某種針對(duì)目標(biāo)物的分析方法,當(dāng)然最后分離得到的目標(biāo)物肯定不純,會(huì)有雜質(zhì),但這肯定遠(yuǎn)不直接液相分析原尿好,我們實(shí)驗(yàn)室有做尿液DNA提取的,方法大概就是這樣。
可行性不大,必須有針對(duì)性分析,舉個(gè)例子你的液相選什么檢測(cè)器,能保證所有物質(zhì)被檢出,你選什么色譜柱,保證所有物質(zhì)被分開,沒有一種檢測(cè)方法是萬能的,你有點(diǎn)夸大液相的用途。
我覺得可行。通過特定目標(biāo)物跟蹤特定疾病。尿液成分含有各種人體代謝物。要去不斷統(tǒng)計(jì)分析。我覺得并不需要太復(fù)雜前處理,最多就去掉液相忌諱之物即可,越原始越好。也許還可以得到特征指紋譜圖。最好尋求中醫(yī)高手和西醫(yī)高手配合搞。
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我都想建立表征各類中醫(yī)指標(biāo)的可量化~可測(cè)度的物性參量,。再用他們適配出對(duì)應(yīng)于中醫(yī)概念的量。這樣就可以借用數(shù)學(xué)等工具,實(shí)現(xiàn)中醫(yī)的量化和可推演探究。建立一套類似牛頓力學(xué)相似的中醫(yī)學(xué)體系。
肯定會(huì)復(fù)雜些,尿液中的組分比較復(fù)雜吧,主要是不能很好判斷是否都能有峰出來。
不可行,你做的代謝標(biāo)志物篩查,要做篩查,最好用高分辨質(zhì)譜最好帶有譜庫(kù)的。對(duì)未知物進(jìn)行分子結(jié)構(gòu)分析。
首先要確定你要測(cè)的代謝物是什么,然后提供相應(yīng)的文獻(xiàn)用對(duì)應(yīng)的液相和色譜柱以及相應(yīng)的測(cè)試方法。這些如果都具備的話用LC-MS就可以做了