現(xiàn)在在做橡膠樹啟動(dòng)子區(qū)域擴(kuò)不出來求大佬幫我看下
兩個(gè)啟動(dòng)子AT含量高達(dá)75.6%和79.6%的啟動(dòng)子然后做了梯度Pcr一個(gè)都沒出來。。。求各位大佬支支招
用的TAKARALaTaq酶
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兩個(gè)啟動(dòng)子AT含量高達(dá)75.6%和79.6%的啟動(dòng)子然后做了梯度Pcr一個(gè)都沒出來。。。求各位大佬支支招
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DNA濃度:644ng/每微升
雖然我也說不出來哪的問題,你可以試試1.擴(kuò)大體系到50ul 2.換成諾唯贊的酶或者其他酶試試 3.找個(gè)肯定能擴(kuò)出片段的引物擴(kuò)增一下,看一下基因組模板或體系有問題沒
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50ul體系搭配溫度梯度一起,也可以稀釋一下模板擴(kuò)增試一下