1. NF-kB信號通路介紹
        NF-κB為一個轉(zhuǎn)錄因子蛋白家族，包括 Rel（c-Rel）、RELB、RelA/p65、NFκB1 p50/p105和NFκB2 p52/p100。這些蛋白起到二聚化轉(zhuǎn)錄因子的作用，可調(diào)節(jié)基因表達，并可影響到各種不同的生物學過程，包括先天和適應性免疫、炎癥、應激反應、B細胞發(fā)育和淋巴器官形成。作為早期轉(zhuǎn)錄因子，NF-κB的激活不需要新翻譯出的蛋白進行調(diào)控。因此，可以在第一時間對有害細胞的刺激做出反應。NF-κB通路可被細胞應激、炎癥細胞因子、生長因子、紫外射線等激活。激活的NF-κB由胞質(zhì)轉(zhuǎn)運到胞核內(nèi)后與特定DNA序列結(jié)合，形成DNA/NF-κB復合物，啟動下游DNA序列轉(zhuǎn)錄并合成蛋白，進而發(fā)揮不同的生物學功能。

        NF-κB信號通路在炎癥,腫瘤發(fā)生,發(fā)展中起著重要作用.許多腫瘤包括血液腫瘤和實體瘤中均發(fā)現(xiàn)NF-κB信號通路的持續(xù)激活. NF-κB信號通路激活可上調(diào)凋亡抑制蛋白Bcl-xL,XIAP,cIAP1,cIAP2和增殖相關(guān)蛋白cyclin D1等的表達從而促進腫瘤細胞增殖,抑制腫瘤細胞凋亡.由于NF-κB與腫瘤的密切關(guān)系,NF-κB抑制劑作為抗腫瘤候選藥物的研究具有巨大潛力.
2. 熒光素報告基因檢測系統(tǒng)
        Luciferase報告基因系統(tǒng)是以熒光素(luciferin)為底物來檢測螢火蟲熒光素酶(fire fly luciferase)活性的一種報告系統(tǒng)。然后可以通過熒光測定儀也稱化學發(fā)光儀(luminometer)或液閃測定儀測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光。熒光素和熒光素酶這一生物發(fā)光體系，可以極其靈敏、高效地檢測基因的表達。是檢測轉(zhuǎn)錄因子與目的基因啟動子區(qū)DNA相互作用的一種檢測方法。
3. NF-kB信號通路抑制劑活性篩選
        NF-kB信號通路抑制劑活性篩選實驗，是以NF-kB-Luc質(zhì)粒構(gòu)建報告基因細胞株，當NF-KB通路被激活后，啟動報告基因轉(zhuǎn)錄。本體系中通常用TNFa作為刺激劑誘導NF-KB通路激活，測試化合物對該通路的抑制活性。


NF-kB信號通路抑制劑.jpg 返回小木蟲查看更多